Иванов А.А., Кондратов И.Г., Люкманова Е.Н., Веремейчик Г.Н., Мазейка А.Н., Цыбульский А.В., Костецкий Э.Я., Санина Н.М.
В журнале Актуальные вопросы биологической физики и химии
Год: 2016 Номер: 1-2 Страницы: 210-214
С целью создания субъединичной вакцины против распространенного и смертельно опасного вирусного заболевания - клещевого энцефалита наиболее целесообразным представляется использование III домена белка Е вируса клещевого энцефалита (ВКЭ), включающего основные эпитопы нейтрализации вируса, и прилегающей к нему С-концевой цепочки белка Е, состоящей из ножки и гидрофобного якоря, необходимого для инкорпорирования белка в созданный нами адъювантный наноноситель антигенов - тубулярный иммуностимулирующий комплекс (ТИ-комплекс). Для получения двух фрагментов белка Е: III домена и III домена с ножкой и гидрофобным якорем была использована экспрессионная система Escherichia coli и бесклеточная система. Показано, что гидрофобный якорь, токсичный для бактерии, разрушается после синтеза в клетке. Однако в бесклеточной среде фрагмент белка Е с гидрофобным якорем был успешно экспрессирован. Иммунизация мышей полученными антигенами как в составе ТИ-комплексов, так и без них показала отсутствие иммуногенности III домена, тогда как III домен с ножкой и гидрофобным якорем в 2 раза эффективнее стимулировал выработку антител по сравнению с контролем. Инкорпорирование этого рекомбинантного белка в ТИ-комплексы приводило к дальнейшему повышению иммуногенности антигена в 1.5 раза. Полученные результаты будут использованы для поиска более эффективных форм С-концевого домена белка Е для получения оптимальной вакцинной конструкции на основе ТИ-комплексов.