Сорокина М.Р., Югай Ю.А., Дегтяренко А.И., Садыков А.А., Шкрыль Ю.Н., Булгаков В.П.
Доклады Российской академии наук. Науки о жизни 2026; 526(1): 89-96
Агробактериальная транзиентная экспрессия является одним из наиболее востребованных инструментов в функциональной геномике и растительной биотехнологии, однако эффективность и воспроизводимость метода зависят от множества факторов. В представленной работе проведена комплексная оптимизация условий агроинфильтрации для повышения уровня экспрессии генов биосинтеза беталаина с использованием визуальной репортерной системы RUBY на модельном растении Nicotiana tabacum. Оценено влияние концентрации бактериальной суспензии, состава инфильтрационного буфера и способа введения агробактерий в листовую ткань. Наибольшая эффективность экспрессии достигалась при использовании суспензии со значением OD600 = 1,0, буфера, содержащего ацетосирингон (50 мкМ), МЭС (10 мМ), сахарозу (0,5%) и хлорид магния (10 мМ), а также при предварительном микропрокальвании листьев игольчатым роллером с последующей вакуумной инфильтрацией. Разработанный протокол повышает эффективность транзиентной экспрессии и может быть применен для функциональной характеристики генов, метаболической инженерии и получения биофармацевтических соединений в растениях.
